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HEP 3B人肝癌细胞
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详细信息
一、细胞基本属性
细胞名称:HEP 3B 人肝癌细胞
细胞简称:HEP 3B
细胞货号:SNL-130
细胞种属:人
生长情况:贴壁
培养条件:H-DMEM+10%FBS+1%双抗
培养环境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期:2-3天
培养基体积:T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例:1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法:
- 尽量吸干净T25瓶原培养基;
- 加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
- T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
- 将培养瓶放入37度培养箱消化;
- 消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
- 混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
- 加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
- 补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格:200-300万/ml,1ml每管
冻存方法:
- 消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
- 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
- 将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
我们推荐使用PG电子代理生物HEP 3B 细胞用培养基 (产品货号:SNLM-130)。
更新时间:2024/4/30 14:18:12
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